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Aureobasidin A (AbA)金擔子素A/短梗霉素A
——Clontech/Takara 酵母菌/真菌轉化實(shí)驗選擇性抗生素/酵母單雜交/雙雜交研究
搜索關(guān)鍵詞：選擇性抗生素；酵母菌轉化系統【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉化系統【構巢曲霉、黑曲霉】；酵母單雜交/雙雜交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；
基本描述：
金擔子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱(chēng)為短梗霉素A，一種來(lái)源于絲狀真菌Aureobasidium pullulansNo. R106的環(huán)酯肽類(lèi)抗真菌抗生素，在較低濃度（0.1-0.5μg/ml）下即可對酵母菌產(chǎn)生毒性，對該抗生素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、構巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillusniger.）。金擔子素AbA通過(guò)抑制真菌生長(cháng)所依賴(lài)的肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經(jīng)酰胺到肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺的合成，導致鞘脂類(lèi)物質(zhì)的合成量不足，細胞膜破裂，進(jìn)而殺死菌株。研究發(fā)現，來(lái)自釀酒酵母菌的AUR1和構巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性，都能夠編碼IPC合成酶，對這兩種基因的點(diǎn)突變，也都賦予菌株對AbA產(chǎn)生很強的抗性，比如：突變基因AUR1-C。
AbA用作選擇性標記的應用和優(yōu)勢：
1. 酵母轉化研究中，金擔子素A（AbA）是一種非常有效的選擇性標志；
2. 使用上基本不需優(yōu)化條件，且創(chuàng )造極低背景。AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報告子，兼容于攜帶相應抗性的酵母單雜交/雙雜交系統，并提供良好的篩選結果。
攜帶AbA抗性基因（AUR1-C）的商業(yè)化載體：
1. 大腸桿菌-酵母菌穿梭載體/大腸桿菌-曲霉穿梭載體（shuttle vector）
簡(jiǎn)單描述：pAUR載體系統包含六種大腸桿菌-酵母菌穿梭載體，每一種特別改造用于釀酒酵母、粟酒裂殖酵母或者構巢曲霉，這些載體都涵蓋一個(gè)新型的藥物抗性選擇性標志（金擔子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或絲狀真菌具有此抗性。
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載體 |
貨號 |
規格 |
特點(diǎn) |
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pAUR101 DNA |
3600 |
20μg |
在酵母細胞內不會(huì )自主復制，僅通過(guò)重組方法整合進(jìn)入染色體才能保留在細胞內。染色體整合和釀酒酵母菌轉化用載體。含來(lái)自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR112 DNA |
3601 |
20μg |
含CEN/ARS區域，在酵母細胞內能自主復制，因此細胞分裂過(guò)程能保持穩定。含AmpR和URA3基因（尿嘧啶選擇性標記），來(lái)自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR123 DNA |
3602 |
20μg |
來(lái)自釀酒酵母菌的AbA抗性基因-AUR1-C。蛋白表達載體和來(lái)源于pAUR112的大腸桿菌-酵母菌穿梭載體；含用于酵母細胞蛋白表達用的ADH1持續性啟動(dòng)子； |
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pAUR135 DNA |
3604 |
20μg |
Vector for marker removal in S. cerevisiae；大腸桿菌-酵母菌穿梭載體； |
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pAUR224 DNA |
3603 |
20μg |
含來(lái)自粟酒裂殖酵母的AbA抗性基因-aur1R；蛋白表達載體，含粟酒裂殖酵母中發(fā)揮作用的CMV持續性啟動(dòng)子； |
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pAUR316 DNA |
3605 |
20μg |
構巢曲霉內能夠自主復制；來(lái)自構巢曲霉的AbA抗性基因-aurAr以及AMA1區域（復制起始區）和AmpR；大腸桿菌-曲霉穿梭載體； |
2. 酵母報告基因載體（yeast reporter vector）
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載體名稱(chēng) |
特點(diǎn) |
備注 |
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pAbAi Vector |
用于單雜交（one-hybrid）實(shí)驗的酵母報告載體，可用來(lái)鑒定和分類(lèi)DNA結合蛋白。特別設計兼容于Matchmaker Gold酵母單雜交篩選系統，順式作用元件（靶向序列）可插入MCS用作誘餌以篩選GAL4 AD/cDNA融合文庫；目標蛋白-DNA的相互作用驅動(dòng)AUR1-C抗性基因表達，從而能篩選到AbA抗性酵母； |
Matchmaker Gold酵母單雜交系統 |
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p53-AbAi Vector |
酵母報告載體，配合Matchmaker Gold酵母單雜交篩選系統的陽(yáng)性對照載體；含p53結合序列（順式作用元件）；AbA抗性基因AUR1-C的表達受GAL4 AD-p53與p53結合序列的相互作用而誘發(fā)；p53-AbAi在酵母細胞內不能游離繁殖，僅當整合進(jìn)入宿主染色體才可以穩定存在，通過(guò)載體上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus發(fā)生同源重組以實(shí)現整合。另，含Col E1復制起始子和AmpR，可實(shí)現大腸桿菌內的擴增和復制。 |
基本特性：
1） 同義名：短梗霉素A
3） 分子量：1100Da
4） 純度：≥95%
5） 熔點(diǎn)：155-157℃
6）溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
產(chǎn)品訂購：更大訂購或產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，請來(lái)電/在線(xiàn)咨詢(xún)，電話(huà)：021-54736159 。網(wǎng)站：www.optimisticestates.com。
或直接參考Clontech官網(wǎng)：http://www.clontech.com/CN/Products/Protein_Interactions_and_Profiling/Yeast_Two-Hybrid/Aureobasidin?sitex=10022:22372:US
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品牌 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
價(jià)格（元） |
貨期 |
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Clontech |
630466 |
Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies【1mg/ml in methanol特殊包裝，經(jīng)濟實(shí)惠】 |
1mg |
1400 |
現貨 |
相關(guān)產(chǎn)品：
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品牌 |
貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
價(jià)格（元） |
貨期 |
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MKbio |
10g |
100 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-25G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉素鈉 |
25g |
220 |
現貨 |
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MKbio |
MS0018-100G |
Ampicillin, Sodium Salt 氨芐青霉素鈉 |
100g |
750 |
現貨 |
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MKbio |
25mg |
285 |
現貨 |
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MKbio |
MF2003-100MG |
100mg |
800 |
現貨 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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