GUS Histochemical Stain Kit GUS染色試劑盒（組織化學(xué)法）

— — 轉基因植物GUS表達活性定性研究

關(guān)鍵詞：β-glucuronidase (GUS) β-葡（萄）糖苷酸酶；X-Gluc；GUS活性檢測；Histochemical 組織化學(xué)定位法；MUG；農桿菌介導的轉基因植物研究；

基本描述：

GUS，英文名β-glucuronidase，中文名β-葡（萄）糖苷酸酶，一種功能非常全面的報告基因檢測系統，廣泛用于植物分子生物學(xué)和微生物學(xué)研究。GUS基因融合系統，根據底物的類(lèi)型，對細胞/組織或蛋白提取液的GUS酶活性進(jìn)行定性或定量分析。組織化學(xué)方法（定性研究）用于GUS融合蛋白表達的亞細胞定位，多以X-Gluc為底物，因其能被水解生成一無(wú)色的葡萄糖醛酸和一肉眼可見(jiàn)的氯-溴靛藍（chloro-bromoindigo）深藍色沉淀。熒光分析法（定量研究）則用于GUS融合蛋白表達水平的研究，常以MUG為底物，因其能被水解生成一無(wú)色的葡萄糖醛酸和一熒光產(chǎn)物4-MU（4-甲基傘型酮），藍色熒光（Ex= 365nm，Em= 445nm）。

由于絕大多數植物細胞內不存在內源性的GUS活性，因此，GUS廣泛用作轉基因植物的報告基因，特別是外源基因瞬時(shí)表達的轉化實(shí)驗。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

本試劑盒以X-Gluc為顯色底物，用于GUS融合蛋白的組織化學(xué)染色（定性研究）。另，該試劑盒含染色所需的所有試劑，只需將X-Gluc溶液和GUS染色緩沖液按比例混合即可制備成GUS染色工作液。該試劑盒可制備50ml染色工作液。具有操作簡(jiǎn)單、快速，穩定，且低背景的優(yōu)點(diǎn)。

產(chǎn)品組分：

產(chǎn)品使用：

一、X-Gluc（50×）溶液的配制

1）于實(shí)驗前提前將X-Gluc Substrate（組分A）、GUS Stain Buffer（組分C）置于室溫回溫至少20min；

2）低速離心組分A，X-Gluc Solvent（組分B）。然后將所有的組分B加入組分A，低速漩渦至粉末完全溶解，即配制X-Gluc（50×）溶液，根據單次用量，-20℃避光保存。

【注意】：正常X-Gluc（50×）溶液呈無(wú)色，若溶液變?yōu)榧t色或棕色，說(shuō)明其失效。

二、GUS染色工作液的配制

按照以下比例，混合制備GUS染色工作液。建議現配現用。

三、GUS染色步驟

1）取材：將根莖、葉片、花瓣等組織剪成小片，放到1.5ml離心管；

【注意】：染色用植物材料的制備方法根據特定組織和器官類(lèi)型而有差異。對于擬南芥的根/花/葉片，以及煙草幼苗的根，可以不做任何預處理直接進(jìn)行染色；但是，對于煙草和馬鈴薯的莖和葉片需要先剪切成薄片（~1-3mm）再進(jìn)行染色。而，更大的組織樣品，需用真空滲透法來(lái)促進(jìn)染色工作液滲入細胞。

2）染色：加入適量體積現配好的染色工作液，以完全覆蓋材料為準。鋁箔紙包好，室溫孵育3h-過(guò)夜。同時(shí)設置陰性和陽(yáng)性對照實(shí)驗；

3）脫色：將染色好的材料轉入70%酒精中脫色2-3次，直至陰性對照材料變?yōu)榘咨?。GUS染色陽(yáng)性的藍色斑點(diǎn)非常穩定，不會(huì )被酒精脫色。

4）觀(guān)察：大部分GUS染色陽(yáng)性的藍色斑點(diǎn)肉眼能觀(guān)察到，然而，有些材料可能藍色斑點(diǎn)很細微，需要顯微鏡下才能觀(guān)察到?！咀⒁狻浚喊咨尘吧系乃{色斑點(diǎn)即為GUS表達位點(diǎn)。

產(chǎn)品訂購：更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，請來(lái)電/在線(xiàn)咨詢(xún)，電話(huà)：021-54736159 。網(wǎng)站：www.optimisticestates.com。

相關(guān)產(chǎn)品：更大包裝或產(chǎn)品技術(shù)問(wèn)題，請來(lái)電/在線(xiàn)咨詢(xún)，電話(huà)：021-54736159 。網(wǎng)站：www.optimisticestates.com。

— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。