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★ 服務(wù)描述
一般情況下，RNA干擾實(shí)驗是通過(guò)化學(xué)合成小片段siRNA，或者構建shRNA表達質(zhì)粒，通過(guò)轉染試劑介導進(jìn)入細胞實(shí)現RNA干擾。但是這兩種方式對于難轉染的細胞（例如原代細胞，干細胞，懸浮細胞等）往往因為轉染效率低而導致RNA干擾實(shí)驗失敗。而通過(guò)構建慢病毒shRNA干擾質(zhì)粒并包裝病毒，再用病毒侵染靶細胞能很好的解決這一難題。
★ 服務(wù)內容
1：shRNA干擾靶點(diǎn)序列的設計；
2：shRNA 慢病毒質(zhì)粒的構建；
3：shRNA慢病毒包裝與病毒滴度測定；
★ 服務(wù)說(shuō)明
1：我們的RNA干擾服務(wù)針對所有的哺乳動(dòng)物細胞，暫不提供植物和原核生物的RNA干擾服務(wù)；
2：RNA干擾的對象可以是編碼蛋白的mRNA序列，也可以是長(cháng)的非編碼RNA(lncRNA)序列；
3：針對不同的靶基因，我們一般設計3-4條干擾序列，保證至少有一條序列干擾效果大于70%（RNA水平）。也可由客戶(hù)提供干擾靶點(diǎn)，但我們不保證干擾效果；
4：我們提供多個(gè)慢病毒干擾載體供客戶(hù)選擇（見(jiàn)下方載體信息）；
5：我公司包裝的shRNA干擾慢病毒顆粒滴度可以達到1×1010TU/ml，完全能夠滿(mǎn)足動(dòng)物實(shí)驗；
★ 客戶(hù)所得
1：構建好的shRNA質(zhì)粒及對照質(zhì)粒；
2：合同規定量的慢病毒顆粒及等量的對照病毒顆粒；
3：完整的實(shí)驗報告（包括實(shí)驗材料，實(shí)驗步驟，實(shí)驗結果等）；
★ 服務(wù)周期
從靶點(diǎn)設計到病毒包裝完成總共需要25個(gè)工作日；
★ 載體信息
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載體編號 |
篩選標記 |
載體骨架主要元件 |
|
|
熒光 |
真核抗性 |
||
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pHY-LV-KD1.1 |
GFP |
無(wú) |
U6-shRNA-CMV-GFP |
|
pHY-LV-KD1.2 |
RFP |
無(wú) |
U6-shRNA-CMV-RFP |
|
pHY-LV-KD1.4 |
無(wú) |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-Puromycin |
|
pHY-LV-KD2.1 |
GFP |
無(wú) |
U6-shRNA-EF1α-GFP |
|
pHY-LV-KD3.1 |
GFP |
無(wú) |
U6-shRNA-UBC-GFP |
|
pHY-LV-KD5.1 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-GFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.2 |
RFP |
Puromycin |
U6-shRNA-CMV-RFP-PGK- Puromycin |
|
pHY-LV-KD5.4 |
GFP |
Puromycin |
U6-shRNA-UBC-GFP-PGK- Puromycin |
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