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關(guān)鍵詞：淋巴細胞活化（Lymphocyte Activation），胞內細胞因子表達，流式分析FACS，PKC激活劑PMA，鈣離子載體，蛋白轉運阻斷劑，CAS：20350-15-6
基本描述：
細胞因子（Cytokines）表達水平高低直接反映細胞在特異性刺激劑（物）下的應答活動(dòng)，免疫學(xué)研究通常使用適當的刺激劑來(lái)激活細胞應答，并通過(guò)某些藥物如莫能霉素（monensin）或布雷非德菌素A（Brefeldin A，BFA）作用以阻斷胞內高爾基體介導的蛋白轉運，促使細胞因子累積，提高細胞因子的胞內信號，從而能借助流式分選技術(shù)（FACS）檢測細胞因子的表達水平。細胞因子表達具有自身的特征性。
常見(jiàn)的蛋白轉運抑制劑：
1、 Monensin莫能霉素，CAS：22373-78-0
簡(jiǎn)單描述：天然離子載體(ionophore)，選擇性結合單價(jià)陽(yáng)離子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+，并將這些陽(yáng)離子轉運到細胞膜內?？善茐母郀柣w，抑制細胞內的蛋白轉運，常用作蛋白轉運抑制劑，用于抑制細胞因子等分泌型蛋白的分泌，使其保留在細胞內。
2、 Brefeldin A（BFA，布雷非德菌素A），CAS：20350-15-6
簡(jiǎn)單描述：一種常用的蛋白轉運抑制劑，特異性地可逆地阻斷蛋白質(zhì)從內質(zhì)網(wǎng)（ER）轉運到高爾基體（Golgi）。經(jīng)BFA處理，高爾基體很快被破壞并融合到內質(zhì)網(wǎng)上，該過(guò)程呈現能量、溫度和微管依賴(lài)性。BFA是一種真菌代謝物，最初曾用作抗病毒試劑，現主要用于研究蛋白轉運。BFA也常被用于抑制細胞因子等蛋白的分泌，并用于增強分泌蛋白的免疫染色檢測。BFA可激活神經(jīng)鞘磷脂循環(huán)（sphingomyelin cycle），還可誘導一些腫瘤細胞發(fā)生凋亡。
一些應用實(shí)例：
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細胞因子 |
克隆號 |
靶向細胞 |
刺激物 |
刺激時(shí)間 |
蛋白轉運抑制劑 |
表面標志蛋白 |
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IL-2 |
JES6-5H4 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
|
IL-3 |
MP2-8F8 |
Purified CD4+ T cells stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) + IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 + IL-4 for 3-4 days |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD4 |
|
GM-CSF |
MP1-22E9 |
Splenocytes stimulated with immobilized anti-CD3 (10 μg/ml) + soluble anti-CD28 (2 μg/ml) for 2 days, wash and then culture in IL-2 (20 ng/ml) + IL-4 (50 ng/ml) for 3-4 day |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
|
IFN-γ |
XMG1.2 |
Splenocytes |
PMA (20 ng/ml) plus ionomycin (1 μg/ml) |
4-6 h |
monensin or brefeldin A |
CD3 |
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
價(jià)格（元） |
貨期 |
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MZ2101-1ML |
1ml |
165 |
現貨 |
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MZ2102-100MG |
Monensin, Sodium Salt 莫能霉素（鈉鹽） |
100mg |
460 |
現貨 |
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200μl |
245 |
現貨 |
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MZ2103-1000UL |
Brefeldin A (BFA, 5mg/ml) 布雷非德菌素A |
1ml |
980 |
現貨 |
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5mg |
880 |
現貨 |
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MZ2104-25MG |
Brefeldin A (BFA, Powder) 布雷非德菌素A（粉末） |
25mg |
3080 |
3-4周 |
相關(guān)產(chǎn)品：
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MZ2151-1MG |
1mg |
535 |
現貨 |
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MZ2151-5MG |
Ionomycin, Free Base 離子霉素（游離酸） |
5mg |
1720 |
3-4周 |
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MZ2152-1MG |
1mg |
535 |
現貨 |
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MZ2152-5MG |
Ionomycin, Calcium Salt 離子霉素（鈣鹽） |
5mg |
1720 |
3-4周 |
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MZ2401-100UL |
100μl |
280 |
現貨 |
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MZ2401-200UL |
PMA (TPA, 5mg/ml) 佛波肉荳蔻醋酸 |
200μl |
510 |
現貨 |
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MZ2402-5MG |
5mg |
1780 |
現貨 |
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MZ2402-25MG |
PMA (TPA, Powder) 佛波肉荳蔻醋酸（粉末） |
25mg |
7150 |
3-4周 |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗室消耗品與實(shí)驗服務(wù)工作，主要從事細胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
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