Acti-stain 670 phalloidin紅色熒光標記鬼筆環肽

(Cytoskeleton Inc. PHDN1-A）

產品標簽

Phalloidin 鬼筆環肽；Actin-Stain^TM 670 Phalloidin；F-actin 肌動蛋白（聚合）；Actin filaments 肌動蛋白絲；Cytochalasin細胞松弛素；Alexa Fluor 680 Phalloidin（Thermo life，A22286）；

基本描述

鬼筆環肽（Phalloidin），又稱鬼筆鵝膏素，是從毒蘑菇鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中分離到的一種七氨基酸多肽毒素，以極高親和力和特異性結合肌動蛋白絲F-actin（聚合形式的肌動蛋白）（Kd=20nM）。鬼筆環肽將肌動蛋白聚合的臨界濃度降至≤1μg/ml，從而用作一種聚合增強劑。熒光探針標記的鬼筆環肽（Fluorescent-conjugated Phalloidins）能對組織培養細胞、組織切片和無細胞制備物進行肌動纖維絲染色。經鬼筆環肽標記的肌動纖維絲仍能維持標記前的許多功能特征包括能夠與肌球蛋白相互作用。

產品應用

1. Fluorescent staining of actin filaments in fixed tissue sections and tissue culture cells preparations]; 對固定的組織切片和組織細胞培養物進行肌動蛋白絲的熒光染色

2. [Preparation of stabilized fluorescent actin filaments in vitro.] 體外制備穩定的熒光肌動蛋白絲；

肌動蛋白染色（Actin Staining）特別適用于確定活細胞和固定細胞內細胞骨架的結構和功能?；罴毎麅鹊募拥鞍准毎羌芎苡谢盍徒Y構不穩定，因此，對肌動蛋白結構的標記或染色前需用甲醛固定。

產品特征

1. 外觀：淺藍色固體；

2. 純度：>99%

3.分子 量：2011

4. 保存：凍干粉4℃干燥保存1年有效；儲存液-20℃避光保存半年有效；

5. 重溶方法：使用前簡單離心使得產品都降至管底，加入500μl 100%甲醇充分溶解后配置成14μM儲存液。建議按照10×50μl分裝，-20℃避光保存，穩定保存6個月。

6. 光譜圖：

應用實例

Fig 1.  Actin-stain^TM 670-鬼筆環肽（Cytoskeleton, PHDN1）染色下的Swiss 3T3成纖維細胞。Actin Stress Fibers stained with Acti-stain? 670 in a Swiss 3T3 cell. Mitotic Swiss 3T3 cell, F-actin stained with Acti-stain? 670 (far-red, Cat. # PHDN1), nuclear DNA stained with Dapi (blue).

使用方法【僅作參考】：

需要材料：1）Actin-stain^TM 670 Phalloidin（PHDN1）；2）蓋玻片爬片生長達到半匯合的Swiss 3T3細胞；3）PBS buffer；4）固定劑；5）破膜劑；7）抗熒光淬滅封片劑；8）100nM DAPI in PBS；11）載玻片；12）蓋玻片封固液（透明指甲油）；

操作流程：咨詢我司工作人員或詳見說明書。

2. 制備穩定的熒光標記肌動蛋白絲（Preparation of stabilized fluorescent actin filaments）

體外肌動蛋白運動試驗（in vitro motility assays），穩定的熒光標記肌動蛋白絲是研究肌球馬達蛋白非常優秀的底物材料。Actin-stain^TM 488 Phalloidin結合對肌球蛋白ATPase的肌動蛋白激活無影響。

需要材料：1）肌動蛋白Actin protein（#AKL99-A）；2）通用肌動蛋白緩沖液General Actin buffer（#BSA01）；3）10×聚合緩沖液Polymerization buffer（#BSA02）；4）Actin-stain^TM 670 Phalloidin（PHDN1）；

操作流程：

1）用250ul 添加0.2mMATP和1.0mM DTT的通用肌動蛋白緩沖液來重懸兔肌肉肌動蛋白（rabbit muscle actin，#AKL99-A），使其濃度為1mg/ml。

2）加入1/10體積的聚合緩沖液來聚合肌動蛋白，室溫孵育1h。

3）用含70nM Actin-stain^TM 670 phalloidin的聚合緩沖液按照1:100的比例稀釋聚合的肌動蛋白絲。

4）吸取1ul標記好的肌動蛋白滴在已滴有一滴抗熒光淬滅劑的載玻片上。

5）取一干凈蓋玻片蓋在液滴處，用紙巾吸掉多余液體。

6）熒光顯微鏡觀察熒光纖維。肌動蛋白絲平均長度為2-10um，在4℃避光能穩定保存1周。

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【說明A】：本品約可做300-350張細胞爬片；

【說明B】：若想保持優異的染色結果，又受成本所限制，強力推薦使用我司MKbio的同類型產品iFluor 680 Phalloidin（# MX4414-300T），絕對進口品牌，經實驗室和客戶的雙重驗證，染色優異，價格實惠，歡迎咨詢和訂購。電話：021-54736159，QQ：2971634497。

【提示A】：見我司整理的MKbio鬼筆環肽及衍生物（Phalloidin and Phalloidin Conjugates）產品專題。

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引用文獻（#PHDN1-A）：

Cuajungco et al., 2012. Abnormal accumulation of human transmembrane (TMEM)-176A and 176B proteins is associated with cancer pathology. Acta Histochemica. v 114, pp 705-712.

 Ahrens et al., 2012. F-Actin Is an Evolutionarily Conserved Damage-Associated Molecular Pattern Recognized by DNGR-1, a Receptor for Dead Cells. Immunity. v 36, pp 635-645.

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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