Alkaline Phosphatase Staining Kit for Stem Cell

堿性磷酸酶染色試劑盒（干細胞專(zhuān)用）

產(chǎn)品標簽：

Phosphatase, Alkaline 堿性磷酸酶；ALP/AKP；對硝基苯酚磷酸鹽（pNPP）；偶氮偶聯(lián)法；顯色法（定量）；染色法（定性）；

產(chǎn)品信息

【溫馨提示I】：見(jiàn)堿性磷酸酶產(chǎn)品專(zhuān)題，了解更多相關(guān)產(chǎn)品資料；

【溫馨提示II】：見(jiàn)堿性磷酸酶染色試劑盒產(chǎn)品專(zhuān)題；

【溫馨提示III】：見(jiàn)堿性磷酸酶活性檢測試劑盒產(chǎn)品專(zhuān)題；

【溫馨提示IV】：見(jiàn)堿性磷酸酶常用生化底物及試劑盒產(chǎn)品；

產(chǎn)品描述

處于未分化狀態(tài)的胚胎干細胞（ES）和誘導多潛能干細胞（iPS）典型特征是呈高水平的堿性磷酸酶表達，同時(shí)結合其他的一些表面標志物，來(lái)顯示未分化細胞具自我更新的潛能。堿性磷酸酶（ALP，或AP）是一種水解酶，堿性條件下能夠將核苷酸、蛋白、甾醇等分子去磷酸化作用。固定ES或iPS用堿性磷酸酶染色試劑盒染色后，未分化細胞呈紅/紫色，而分化細胞呈無(wú)色。

本堿性磷酸酶染色試劑盒特異性強，靈敏度高，可為ES/iPS細胞分化的表型評估提供可靠的依據。對于其他細胞來(lái)說(shuō)，染色越深，表明細胞內ALP活性越高。以24孔板染色為例，分別可做50次和100次染色。

產(chǎn)品組分

保存與運輸方法

保存：2-8℃保存，6個(gè)月穩定。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟（以24孔板染色為例）

1. 實(shí)驗前準備材料：PBST緩沖液、PBS緩沖液

2. 染色工作液準備：按照如下比例【溶液A: 溶液B: 溶液C=1:1:1】，配制適量染色工作液。請務(wù)必根據單次實(shí)驗用量制備染色工作液。為了保證最佳染色結果，需在配制30min內用完染色工作液，多余染色工作液請丟棄。

3. 染色步驟

1. 吸出細胞培養液，PBST洗2~3次，用0.5ml固定液室溫固定2~5min?！咀⒁狻浚汗潭ú灰^(guò)5min，過(guò)度固定會(huì )導致ALP失活）。

2. 吸出固定液，PBST洗2次；

3. 吸出PBST。加入0.6ml/孔染色工作液覆蓋細胞，室溫避光放置5~15min；【注意】：染色過(guò)程需密切監督顏色變化，當顏色很明亮即可終止反應，否則會(huì )引起非特異性染色。

4. 吸出染色工作液，用PBS洗2次，最后保存于PBS或封片劑內防止干燥，顯微鏡下觀(guān)察染色結果。結果判定：未分化細胞染色呈紅/紫色，分化細胞染色呈無(wú)色。

5. 將平板保存在4℃。

相關(guān)產(chǎn)品

引用文獻：

[1]Li, Z., Zhao, H., Chu, S. et al. miR-124-3p promotes BMSC osteogenesis via suppressing the GSK-3β/β-catenin signaling pathway in diabetic osteoporosis rats. In Vitro Cell.Dev.Biol.-Animal 56, 723–734 (2020). https://doi.org/10.1007/s11626-020-00502-0

An Alkaline Phosphatase Staining Kit (MP7503-50T, MKBio, Shanghai, China) was used for ALP staining. The cells were seeded into a 6-well plate, fixed with 4% paraformaldehyde (pH 7.4) for 1–2 min, and washed twice with phosphate buffered saline (PBS) and tris buffered saline with tween (TBST).

41.   Zhang X, Hong K, Sun Q, Zhu Y, Du J. Bioreducible, arginine-rich polydisulfide-based siRNA nanocomplexes with excellent tumor penetration for efficient gene silencing. Biomater Sci. 2021 Jun 28. doi: 10.1039/d1bm00643f. Epub ahead of print. PMID: 34180478.

PEI 25K was purchased from Maokang Biological Technology Co., Ltd