WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

產品標簽

WST-1；CCK-8；WST-8；MTT 噻唑蘭；Alamar Blue 阿爾瑪藍；XTT；CAS：150849-52-8；

產品信息

產品描述

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）是一種廣泛用于細胞增殖和細胞毒性檢測的快速高靈敏度試劑盒。

WST-1是MTT（噻唑蘭）的升級產品，檢測原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，WST-1可被線粒體內的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色甲臜產物（formazan）。顏色的深淺與活細胞數量（細胞增殖）成正比，與細胞毒性成反比。通過酶標儀在450nm波長處測定OD值來反映細胞增殖以及細胞毒性水平。WST-1和MTT，以及其它MTT類似產品比如：XTT、MTS相比具有明顯的優勢：①WST-1、XTT和MTS生成的甲臜產物是水溶的，可以省去后續的溶解步驟；不像MTT，生成的甲臜產物不是水溶的，必需用特定的溶解液來溶解；②WST-1生成的甲臜產物比XTT和MTS生成的更易溶解；③WST-1比XTT和MTS更加穩定，使結果更加穩定；④WST-1比XTT和MTS的線性范圍更寬，靈敏度更高。

WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒適用于細胞因子等誘導的細胞增殖檢測，也可用于小分子藥物等誘導的細胞毒性或細胞生長抑制實驗等。本試劑盒操作便捷，所有的檢測步驟在一塊96孔板內即能完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞。也不需要額外步驟來溶解甲臜產物，可用于大批量樣品的檢測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

我司提供兩種規格的試劑盒，按照96孔板來計算，分別可以做100個孔（MX3007-100T）和500個孔（500T）。

產品組分

保存與運輸方法

保存：-20℃避光保存，一年有效。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）使用96孔板進行檢測，如果細胞培養時間較長，一定要注意蒸發的問題。①由于96孔板周圍一圈最容易蒸發，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS、無菌水或培養液；②可以把96孔板置于靠近培養箱內水源的地方以緩解蒸發。

2）接種時注意細胞懸液一定要混勻，以避免細胞沉淀下來導致每孔中的細胞數量不等，可以每接種幾個孔就混勻一下。

3）培養基內的酚紅和血清不會顯著干擾結果。

4）如果沒有450nm的濾光片，可以使用吸光度在420-480 nm之間的濾光片。

5）如果樣品為高渾濁的細胞懸液，建議設定＞600nm的波長作為參比波長，扣除參比波長的OD值即可。

6）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存液制備

1）對于WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MX3007-100T）：于使用前，將盒子內的1管WST-1（粉末）從冰箱取出，置于室溫至少回溫20min，之后加入1ml 電子耦合試劑，完全溶解即得到WST-1溶液；

2）對于WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒（MX3007-500T）：于使用前，將盒子內的1管WST-1（粉末）從冰箱取出，置于室溫至少回溫20min，之后加入5ml 電子耦合試劑，完全溶解即得到WST-1溶液；

3）WST-1溶液于4℃保存一周，不影響使用效果。短期不用務必分裝后置于-20℃保存，半年穩定。凍存的WST-1溶液融化后可能會觀察到一些沉淀物，此為正?，F象?？捎?/span>37℃水浴2-10min，通常能完全溶解。

檢測流程（96孔板）

1）收集對數期細胞，96孔平底板內接種細胞，調整細胞密度為1×10⁴-1×10⁵細胞/孔，每孔接種100μl（含或不含待測的化合物）。

【注①】：具體每孔所用的細胞數目，需根據細胞大小，細胞增殖速度的快慢以及實驗用途等因素決定。對于細胞毒性實驗，建議接種更高的起始細胞，比如：5×10⁴-1×10⁵細胞/孔。

【注②】：接種時，需注意四周孔用無菌水、無菌PBS或細胞培養基填充。

【注③】：【可選】根據自身實驗設計選擇適宜時間加入藥物，一般來說，細胞貼壁后即可加藥， 或2h，或12h，每孔0-10μl，設3-5個復孔。建議設5個復孔。

【注④】：需設置空白對照孔（不含細胞，僅含培養基，WST-1）。

2）5% CO₂，37℃培養細胞24-96h。

3）每孔加入10μl WST-1溶液（注意不要引入氣泡），繼續培養0.5-4h。

【注①】：若藥物與 WST-1 有反應，可先離心后棄去培養液，小心用 PBS 沖2-3 遍后，再加入含 WST-1的培養液。

【注②】：在細胞培養箱內繼續孵育時間長短根據細胞的類型和細胞密度等實驗情況而定，初次實驗時可以在 0.5、1、2 和 4h后分別用酶標儀檢測，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續實驗。

4）把 96孔板置于搖床上搖動1min，以充分混勻待檢測體系。

5）在450nm處測定吸光度。如無450nm 濾光片，可以使用 420-480nm的濾光片。另外，可以使用＞600nm 的波長作為參考波長進行雙波長測定。

結果分析

1）細胞增殖分析

2）細胞毒性分析

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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