Pollen Viability Test Kit (TTC)

花粉活力檢測試劑盒（TTC法）

產品信息

應用背景

花粉活力的大小直接影響授粉、受精過程，與植物的產量密切相關，通過花粉活力的測定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形態、生理特征，花粉活力的檢測方法常用的有：花粉萌發測定法、碘-碘化鉀（I2-KI）染色法、TTC染色法、過氧化物酶檢測，MTT、FDA等方法。

產品描述

TTC，英文名2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride，中文名2,3,5-三苯基氯化四氮唑，又稱為紅四氮唑，是一種氧化還原指示劑，具有標準的氧化還原電位（80 mV）。溶于水形成無色溶液，還原后生成不溶于水的三苯基甲臜。此物質比較穩定，不易被氧化，因此，TTC廣泛用于酶試驗中測定花粉活力。

本花粉活力檢測試劑盒（Pollen Viability Test Kit）就是基于TTC的特性，用作酶試驗的氫受體，TTC還原量反映脫氫酶活性，從而判斷花粉的活力?；盍姷幕ǚ廴旧蟪始t色，弱活力的花粉染色后呈淡紅色，無活力或不育的花粉呈無色。

試劑盒組成

注意事項

1） 本品開蓋后請盡快使用，否則效率會下降。如果溶液變成紅色，需棄用。

2） TTC染色液對人體有輕微刺激性，請注意小心防護；

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

保存與運輸方法

保存：2-8℃避光保存，6個月有效。

運輸：冰袋運輸。

操作方法【詳見懋康網站整理】

2.1取適量的TTC染色液恢復至室溫，混合均勻待用。

2.2取成熟將要開放的新鮮花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.3將花粉物質置于載玻片上，滴加1-2滴TTC染色液，蓋上蓋玻片。

【注】：染色時需將花粉完全浸沒于染色液中；

2.4恒溫箱放置，低倍顯微鏡觀察著色情況，每片取5個視野。

【注】：染色溫度一般以25-35℃為宜。染色時間一般以30min-60min，具體根據實際情況調整。

三、染色結果觀察：

活力強——紅色；

活力弱——淡紅色；

無活力或不育——無色。

計算：觀察并統計100?；ǚ?，計算有活力花粉的百分數，其公式為：

花粉活力百分數（%）=有活力花粉數/100 ×100%

染色示例（來自文獻，僅做參考）

文獻來源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

試驗對象：鳳丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

試驗目的：比較九種不同的花粉活力檢測方法，包括：MTT、醋酸洋紅、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 過氧化物酶、亞甲基藍、FDA等，來鑒別有活力和無活力花粉。

試驗結果：

Fig.Comparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

試驗結論：本課題中發現MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效區分有活力和無活力花粉，其中，FDA染色結果與花粉萌發結果類似。

文獻來源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

試驗對象：紅薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

試驗目的：花粉活力測定

試驗圖片：

Fig.Comparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar =?200 μm. (b) TTC, bar =?200 μm. (c) Magenta acetate, bar =?200 μm. (d) FDA, bar =?200 μm. (e, f) In situ germination, bar?=?500 μm. (g) In vitro germination, bar =?100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P?<?0.001), and error bars represent standard deviations

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