Pollen Viability Test Kit (I2-KI)

花粉活力檢測試劑盒（I2-KI法）

產品信息

應用背景

花粉活力的大小直接影響授粉、受精過程，與植物的產量密切相關，通過花粉活力的測定，可了解花粉的可育行，并掌握不育花粉的形態、生理特征，花粉活力的檢測方法常用的有：花粉萌發測定法、碘-碘化鉀（I2-KI）染色法、TTC染色法、過氧化物酶檢測，MTT、FDA等方法。

產品描述

碘-碘化鉀（Iodine-potassium Iodide,I2-KI）是常用的花粉活力染色方法之一，工作原理在于：大多數植物正常成熟的花粉呈規則形狀，如圓球形或橢球形、多面體等，且積累較多淀粉，用I2-KI染色，可被染成藍色。而發育不良的花粉常呈畸形，往往不含淀粉或積累較少淀粉，用I2-KI染色，或不被染色或被染成黃褐色。因此，根據花粉的染色情況，能鑒別出花粉的活力。

試劑盒組成

注意事項

1） 本品開蓋后請盡快使用，否則效率會下降。

2） I2-KI染色法不能準確表示花粉的活力，也不適用于研究某一處理下對花粉活力的影響。因為核期退化的花粉已累積有淀粉，用I2-KI染色呈藍色；另外，含有淀粉而被殺死的花粉用I2-KI染色也會呈藍色。

3） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作方法【詳見懋康網站整理】

2.1取成熟將要開放的新鮮花朵，小心去除花瓣和雌蕊。

2.2將花藥物質置于載玻片上，滴加1滴蒸餾水，用鑷子或其他工具將花藥搗碎，使得花粉粒釋放出來。

2.3滴加1~2滴I2-KI染色液【注：需將花粉完全浸沒于染色液中】，蓋上蓋玻片，光學顯微鏡下觀察。

2.4觀察2~3張裝片，每片取5個視野，統計花粉的染色率，以染色率表示花粉的育性。

三、染色結果觀察：

活力強——藍色；

活力弱——不被染色或被染成黃褐色；

無活力或不育——無色。

計算：觀察并統計100?；ǚ?，計算有活力花粉的百分數，其公式為：

花粉活力百分數（%）=有活力花粉數/100 ×100%

染色示例（來自文獻，僅做參考）

文獻來源1）Li M, Jiang F, Huang L, Wang H, Song W, Zhang X, Zhang Y, Niu L. Optimization of In Vitro Germination, Viability Tests and Storage of Paeonia ostii Pollen. Plants (Basel). 2023 Jun 27;12(13):2460. doi: 10.3390/plants12132460. PMID: 37447022; PMCID: PMC10346979.

試驗對象：鳳丹（Tree peony (Paeonia ostii)）

試驗目的：比較九種不同的花粉活力檢測方法，包括：MTT、醋酸洋紅、TTC、I2-KI、benzidine-H2O2、 過氧化物酶、亞甲基藍、FDA等，來鑒別有活力和無活力花粉。

試驗結果：

Fig.Comparison of the nine staining methods of Paeonia ostii pollen grains. (A) MTT staining method; (B) Acetic carmine staining method; (C) TTC staining method; (D) I2-KI staining method; (E) Benzidine-H2O2 staining method; (F) Peroxide staining method; (G) Methylene blue staining method; (H) Inorganic acid staining method, and (I) FDA staining method. Grey arrows indicate non-viable pollen; red arrows indicate viable pollen.

試驗結論：本課題中發現MTT、TTC、benzidine-H2O2、FDA能有效區分有活力和無活力花粉，其中，FDA染色結果與花粉萌發結果類似。

文獻來源2） Weng Z, Deng Y, Tang F, Zhao L, Zhao L, Wang Y, Dai X, Zhou Z, Cao Q. Screening and optimisation of in vitro pollen germination medium for sweetpotato (Ipomoea batatas). Plant Methods. 2023 Aug 29;19(1):93. doi: 10.1186/s13007-023-01050-w. PMID: 37644497; PMCID: PMC10463589.

試驗對象：紅薯（sweetpotato (Ipomoea batatas)）

試驗目的：花粉活力測定

試驗圖片：

Fig.Comparison of different pollen viability testing methods. (a) I2-KI, bar =?200 μm. (b) TTC, bar =?200 μm. (c) Magenta acetate, bar =?200 μm. (d) FDA, bar =?200 μm. (e, f) In situ germination, bar?=?500 μm. (g) In vitro germination, bar =?100 μm. (h) Active pollen rates measured by TTC, Magenta acetate, FDA and in vitro germination. Different letters indicate statistically significant differences (P?<?0.001), and error bars represent standard deviations

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