Biotin-NHS (D-Biotin N-Succinimidyl Ester)

 D-生物素 N-羥基琥珀酰亞胺酯

搜索關(guān)鍵詞

Biotin-NHS；NHS-Biotin；Sulfo-NHS；Sulfo-SMCC；異型雙功能交聯(lián)劑；NHS酯（胺基指向）；CAS NO：35013-72-0；

產(chǎn)品信息：【溫馨提示：本品可接受公斤kg級詢(xún)價(jià)，歡迎咨詢(xún)，電話(huà)：021-54736159?！?/span>

產(chǎn)品描述

D-生物素 N-羥基琥珀酰亞胺酯（D-Biotin N-Succinimidyl Ester, Biotin-NHS）是最受歡迎的胺反應生物素衍生物，用于修飾蛋白和其它生物分子（溫和條件下）。Biotin-NHS具細胞膜滲透性，可用于共價(jià)標記胞內蛋白，以及常常用于蛋白檢測，當與鏈霉親和素和固定化鏈霉親和素聯(lián)合使用，用于各種生物素-鏈霉親和素結合實(shí)驗。

產(chǎn)品特性

保存與運輸方法

保存：-20℃干燥保存，至少1年穩定。

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1）Biotin-NHS用DMSO或DMF重溶配制成儲存液（比如：10mg/ml），若單次不能用完，置于≤-20℃保存，2周內用完。

2）為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作。

通用操作步驟

1. 開(kāi)瓶前將本品從冰箱取出置于室溫平衡至少20min。

2. 用100mM 磷酸鈉，150mM NaCl，pH 7.2-7.5或其它適合的無(wú)胺緩沖液來(lái)溶解蛋白使其濃度為1-10mg/ml。

【注①】：如果蛋白內含疊氮鈉或小分子穩定劑的防腐劑，則需將蛋白先透析到無(wú)胺緩沖液內去除雜質(zhì)；

【注②】：如果蛋白溶于Tris或甘氨酸緩沖液，則需將蛋白先透析到無(wú)胺緩沖液內去除雜質(zhì)；

3. 一旦開(kāi)始使用，用無(wú)水DMF或DMSO配制20mg/ml Biotin-NHS。

4. 加入足量的Biotin-NHS儲存液到蛋白溶液中，使得Biotin-NHS與蛋白的過(guò)剩摩爾比達10-20倍，充分混勻。

【注①】：為了保證最佳結果，第一次實(shí)驗可測試5:1; 10:1; 15:1; 20:1的過(guò)剩摩爾比，以確定最優(yōu)比率。

【注②】：最終標記體系內確保DMSO或DMF的含量≤10%總體積。

5. 于室溫孵育30-60min，或于4℃孵育≥2h，反應過(guò)程溶液處于持續震蕩中。

6. 通過(guò)透析或者樹(shù)脂凝膠過(guò)柱（比如：Sephadex G-25）的方法脫鹽純化生物素化標記蛋白。

【注①】：生物素化標記蛋白需保存在含載體蛋白（比如：0.1% BSA）的緩沖液內，濃度＞0.5mg/ml。

【注②】：為了長(cháng)期保存，生物素化標記蛋白可以?xún)龈苫蚍盅b成單次用量置于-80℃保存。

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 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

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